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临床上普遍使用哪几种技术检测HPV病毒感染?

文章导读:

目前临床上普遍使用哪几种技术检测HPV病毒感染?

1、目前临床上普遍使用哪几种技术检测HPV病毒感染?

(1)杂交捕获DNA 分析(HCII)

杂交捕获DNA 分析是由美国Digene 公司推出的非放射性HPV-DNA 分析系统, 它联合应用高效的液相杂交方法和敏感的化学发光信号扩增系统。第一代俘获试剂盒能检测14 种HPV, 其中高危型为9 种,可对HPV-DNA 进行分型和定量分析,其灵敏度和特异性均较高。新一代的俘获试剂盒可检测18 种HPV,其中高危型为13 种, 比第一代更可靠,其检测低限为HPV DNA 0.2~1.0 ng/L 。应用HC-Ⅱ诊断宫颈 CIN Ⅱ级以上病变国内外报告的敏感性80%~95% ,特异性为50%~85% 。HCⅡ的缺点为仅能定量不能分型,如果高危型HPV检测(HCⅡ)联合细胞学检查,对于CINⅠ患者诊断的灵敏度、特异度分别高达100%、97.2%,因此临床意义重大。两种方法联合使用,既减少了不必要的阴道镜检查及病理活检,同时可延长随诊间隔时间,作为宫颈病变治疗后随访指标。

(2)、核酸扩增分型检测试剂盒

该检测试剂盒是唯一通过中国SFDA 认证的凯普公司的 HPV基因精确分型检测试剂盒,以凯普医用核酸分子快速杂交仪作为平台,集 PCR 检测法、杂交法、基因芯片法于一身的凯普 HPV 基因分型检测试剂盒与临床病理病变结果具有较高的一致性,同时又可以弥补其他 HPV 检测方法灵敏度低、漏诊率高、可检测 HPV 亚型数少、假阳性、假阴性率高等缺点,是临床 HPV 病毒超早期检查的最优的检测方法。

2、最新推出或即将推出的HPV临床检测技术都有哪几种?

随着HPV-宫颈癌的研究不断深入,国内外很多研究机构和公司投入大量的科研力量财力和科研力量,研发检测HPV DNA,RNA 和特异蛋白的检测技术及试剂盒,已取得了显著的进展。以下介绍的是2010年在加拿大蒙特利尔召开的第26届国际HPV病毒学术会议上推出的最近成型检测技术:

(1)美国HOLOGIC公司最新推出的HPV病毒检测技术

2009年3月美国FDA宣布通过两种新的HPV DNA诊断方法。一种检测用于检测14种高危型的HPV,型别包括HC2的13种亚型(16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59,68)和66型,商品名为CervistaTM HPV HR。另一种检测用于检测HPV16和18型并分型,商品名为CervistaTM HPV 16/18。这两种方法均是应用恒温酶DNA扩增和荧光发光判读结果的原理,而且都通过了新柏氏TCT标本进行的临床验证。这是2008年Hologic公司(新柏氏TCT生产商)第三次技术革新的产物。

(2)美国ROCHE公司创新产品(cobas? 4800 HPV Test(CE-IVD) AMPLICOR HPV Test (CE-IVD) ,LINEAR ARRAY HPV Genotyping Test (CE-IVD) ;

(3)美国GEN-PROBE公司创新产品(The APTIMA E6/E7 mRNA test)。

3、临床应用需求研发新的检测技术

目前临床上普遍应用的都属于HPV病毒DNA检测技术。只要是宿主细胞被高危型HPV病毒感染(无论是“活动性感染”还是“潜伏性感染”,或兼而有之)均有病毒DNA存在,因此可采用检测病毒DNA技术进行检测。

但从治疗高危型HPV病毒感染的角度评估,HPV病毒“活动型感染”和“潜伏性感染”是两个不同的概念。在致病机制上,HPV病毒“活动型感染”是病毒感染宿主细胞的主要形式,而“潜伏性”感染是病毒持续性感染的一种基本方式,其能引发宫颈癌的发生。从病毒形态和基因结构上,HPV病毒“活动感染”病毒含有病毒DNA(E)和外壳蛋白(L);而“潜伏感染”病毒只含有病毒DNA(E)无病毒外壳蛋白(L)。

分析临床干预和治疗高危型HPV病毒感染的药物作用机制,抗病毒药物直接杀灭病毒的作用主要是针对HPV病毒粒子(活动型感染),而对潜伏性感染,由于HPV病毒DNA是以镶嵌的方式与宿主DNA整合,因此只有以来机体的细胞免疫机制来清除被感染细胞,进而达到清除潜伏性感染的目的。据此,HPV病毒“活动感染”转阴和病毒载量消长及“潜伏感染”病毒滴度的变化,能科学的指导临床治疗。

因此,市场需求能判定HPV病毒活动性感染的特异检测技术,该技术利用抗原抗体反应的原理,特异性检测高危型HPV病毒某种蛋白,只要病毒特异性蛋白存在,即表明HPV病毒活动性感染仍在继续,以此能及时为临床提供高危型HPV病毒“活动感染”变化的情况,对临床用药起到重要的参考作用。但目前此类检测技术目前还在建立和完善中。

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